Penjelasan lengkap mengenai apa itu metode HPLC yang istilah ini sering dibahas saat praktikum di laboratorium kimia, laboratorium industri farmasi, laboratorium bioteknologi dan ilmu hayat serta ilmu eksak lainnya.
HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid Chromatography atau disebut dengan KCKT dalam bahasa Indonesia. KCKT adalah Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.
Pada postingan ini dari grosirjaslab.com akan membahas secara lengkap mengenai metode ini aplikasinya. Share informasi ini kepada teman-teman kamu ya.
Apa Itu Kromatografi dan HPLC termasuk kromatografi apa
Paragraf ini menjelaskan mengenai kromatografi secara umum. Kalau kamu sudah paham apa itu kromatografi dan hendak mencari informasi mengenai HPLC, langsung scroll ke paragraf selanjutnya. Dibahas secara lengkap kok.
Kromatografi adalah suatu teknik pemisahan zat di dalam campuran dengan memanfaatkan distribusi dari komponen yang hendak dipisahkan tersebut. Pemisahan ini menggunakan metode fisika.
Biasanya butuh 2 fase, fase diam dan fase bergerak. Fase Diam bisa berupa padat atau cairan yang dilapiskan kedalam padatan sedangkan Fase Bergeraknya berupa cairan atau gas.
Masih Bingung? Hehehe, tenang saja… Ikuti tulisan ini sampai selesai.
Misalkan kamu hendak memisahkan komponen gula dari larutan kopi, susu dan gula (kopi 3 in 1). Kopi susu di sini hanya contoh saja ya, supaya mudah memahami. Cairan kopi 3 in 1 ini diteteskan di fase diam, misalkan di kertas (disebut kromatografi kertas) atau di suatu lapisan tipis (disebut kromatografi lapis tipis).
Kemudian di salah satu sisi kertas atau lapis tipis ini dicelupkan ke dalam fase bergerak (misal cairan). Cairan yang digunakan adalah cairan yang dapat melarutkan gula. Cairan merambat ke atas membawa komponen di dalam kopi susu tersebut. Sehingga terpisah menjadi beberapa bagian.
Pemisahan terjadi karena perbedaan setiap zat terdistribusi oleh cairan (fase gerak). Ini menggunakan prinsip fisika.
Masih bingung juga? lihat gambar berikut:
Jenis-Jenis Kromatografi – HPLC masuk Kromatografi Gas
Berdasarkan jenis fase padat dan fase bergeraknya, kromatografi dibedakan menjadi:
| Fase Diam | Fase Bergerak | Jenis Kromatografi | Prinsip |
| Gas | Padat | Gas-padat | Adsorpsi |
| Cair | Padat | Kertas, Lapis tipis, Kolom | Adsorpsi, Partisi, Pertukaran ion, Penyaringan gel |
| Cair | Cair | Kertas, Lapis tipis, Kolom | Partisi |
| Gas | Cair | Gas-Cair | Partisi |
HPLC atau KCKT termasuk dalam kromatografi gas-cair.
Prinsip KCKT atau HPLC
HPLC menggunakan prinsip kromatografi gas. Digunakan untuk memisahkan senyawa-senyawa organik yang mudah menguap.
Kromatografi HPLC ini menggunakan fase gerak berupa gas dan fase diam berupa cair.
Biasanya digunakan untuk menganalisa komposisi kimia dari zat yang belum diketahui. Misalnya untuk mengetahui kadar pestisida dalam air tanah.
Yang membedakan antara HPLC dengan kromatografi gas biasa adalah waktunya. Pada kromatografi gas biasanya berlangsung lama sedangkan pada HPLC hasil analisa cepat didapatkan.
Ini terjadi karena pada HPLC menggunakan tekanan dan kecepatan yang cukup tinggi sehingga selain lebih cepat, juga dihasilkan resolusi yang lebih baik dibandingkan kromatografi jenis lain. Inilah sebabnya kenapa disebut kinerja tinggi atau high performance.
Setiap menggunakan HPLC ini setiap laboran haruslah menggunakan jas laboratorium. Salah satu produsen jas laboratorium yang berpengalaman adalah kita konveksi. Melayani pembelian grosir maupun satuan.
Kelebihan HPLC dibandingkan kromatografi lain:
- Hasil analisa lebih cepat
- resolusi jauh lebih tinggi
- Sensitivitas detektor lebih tinggi
- Kolom yang telah digunakan bisa digunakan kembali
- Cocok digunakan untuk zat dengan molekul besar.
Sedangkan kekurangannya adalah di harga alat yang mahal. 😀 Kalau dilihat di forum quora, harga HPLC berkisar 20K – 25 K ponsterling. Ya kisaran 300 – 350 juta.
Lihat gambar berikut untuk gambaran prinsip kerja HPLC:
Jangan lupa share artikel tentang apa itu metode HPLC ini kepada teman-teman Anda. Mereka mungkin membutuhkan. Oh ya, sebelum bekerja di laboratorium juga perlu tahu cara menggunakan jas lab yang benar seperti apa ya.